美国白蛾基因组DNA提取及RAPD反应条件优化

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用改进的SDS法从无水乙醇浸泡美国白蛾幼虫标本中提取到高分子量的可用于RAPD扩增的基因组DNA。用正交试验对影响RAPD扩增的条件进行优化得到最佳反应体系:20μL反应体系中,模板浓度1.25ng/μL、引物浓度1.2ng/μL、dNTP浓度0.2mmlol/L、Mg^21 浓度3.0mmol/L、TaqDNA聚合酶用量2.5U。确定最佳退火温度为38℃。PCR反应条件:94℃ 30S、38℃ 60S、72℃ 60S 35个循环后,72℃延伸5min。为在分子水平上讨论美国白蛾种群的遗传分化提供基础。
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