瑶药消瘤藤体外抗肿瘤活性部位筛选

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目的:筛选瑶药消瘤藤中的体外抗肿瘤部位。方法:采用溶剂提取,硅胶柱色谱法对消瘤藤中的总香豆素及总苷类成分进行提取分离,紫外分光光度法测定总香豆素和总苷的含量;CCK8法和克隆形成实验检测对肿瘤细胞的增殖活力的影响、划痕实验及Transwell侵袭小室观察肿瘤细胞迁移、侵袭能力的改变,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2、Caspase3和NF-κB的蛋白表达。结果:消瘤藤总香豆素中香豆素含量为65.43%,总苷含量为52.02%。消瘤藤总香豆素部位可呈剂量依赖方式显著提高对人肝癌HepG2细胞、人结肠癌HT-29细胞、人神经胶质瘤U87细胞及人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的抑制率,显著抑制HT-29细胞的克隆、迁移及侵袭能力,显著下调Bcl-2、NF-κB的蛋白表达,上调Caspase3的蛋白表达。结论:总香豆素部位为消瘤藤抗肿瘤的活性部位,能抑制HT-29细胞的增殖、克隆、迁移及侵袭能力,其机制可能与上调Caspase3蛋白表达,下调Bcl-2和NF-κB蛋白表达有关。
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