【摘 要】
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将含有乙型肝炎病毒(HBV)Pre-S及S基因开放读码框架的DNA片段克隆到逆转录病毒表达载体Pzip-neo SV(X)的5′-端长末端重复序列(LTR)下游BamH Ⅰ位点,构建成重组质粒Pzip-HBS
【机 构】
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中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室,中国医学科学院医学生物学研究所
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将含有乙型肝炎病毒(HBV)Pre-S及S基因开放读码框架的DNA片段克隆到逆转录病毒表达载体Pzip-neo SV(X)的5′-端长末端重复序列(LTR)下游BamH Ⅰ位点,构建成重组质粒Pzip-HBS。用磷酸钙沉淀技术将重组质粒转染到辅助包装细胞ψ-2中,经G418筛选,2周后获得的抗性细胞克隆能有效地表达HBsAg。5×10~6细胞培养48小时之后,收集上清,用放射免疫方法测得HBsAg产量达6283cpm,P/N值为32.6。Western blot证实,在分子量约23kD处有一条与
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