【摘 要】
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为了提高葡萄糖氧化酶(GOD)在毕赤酵母中的表达水平,提出了甲醇/山梨醇混合碳源诱导和共表达分子伴侣二硫键异构酶(PDI)和透明颤菌血红蛋白(VHb)两种策略。利用对照菌株X33/p
【机 构】
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福建师范大学生命科学学院; 中国科学院微生物研究所;
【基金项目】
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福建省产业化关键技术项目(No.闽财指[2010]358号)资助~~
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为了提高葡萄糖氧化酶(GOD)在毕赤酵母中的表达水平,提出了甲醇/山梨醇混合碳源诱导和共表达分子伴侣二硫键异构酶(PDI)和透明颤菌血红蛋白(VHb)两种策略。利用对照菌株X33/p PIC9k–GOD在5 L发酵罐放大培养时,采用甲醇/山梨醇混合碳源诱导,GOD最终酶活为456 U/m L,比只采用甲醇作为单一碳源诱导时GOD最终酶活提高了20%。利用整合伴侣蛋白菌株X33/p PIC9k-GOD/p PICZ-PDI-VHb在5 L发酵罐进行高密度发酵,采用甲醇/山梨醇混合碳源诱导,GOD最终酶活达到716 U/m L,蛋白浓度为7.4 g/L。研究结果对提高外源蛋白在毕赤酵母中的表达有重要参考价值。
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