用Bubble PCR法对一个新的锌指基因进行外显子划界

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介绍了一种确定基因外显子-内含子交界点的快速、准确的方法,应用该方法对本室克隆的一个新的锌指基因ZNF191进行了外显子划界。将含有ZNF191全长cDNA的基因组DNA经限制酶酶切后与退火的Bubble linker连接,以该连接产物为模板,用依据cDNA序列设计的引物和Bubble linker上的特异引物进行PCR扩增,继以相同的扩增条件对扩增产物进行测序,从而确定了外显子-内含子的交界点。
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