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目的
探讨微小RNA (miR)-148a对人胃癌细胞增殖的影响及可能机制。
方法采用实时定量PCR技术检测60例胃癌组织及癌旁组织中miR-148a的表达水平。利用慢病毒包装建立稳定表达miR-148a的MKN45细胞系为转染组,未转染的MKN45细胞系为对照组。CCK8法检测MKN45细胞的增殖情况,通过targetscan预测miR-148a的靶基因,Western-blot检测靶基因的表达水平。
结果54例(90.0%,54/60)胃癌组织中miR-148a的表达量较癌旁组织下调,其中37例(61.7%,37/60)下降2倍以上;淋巴结转移、有无癌旁血管浸润及TNM分期Ⅲ~Ⅴ期者其表达量明显降低(P<0.05)。转染miR-148a后3 d, MKN45细胞生长明显受抑,转染组吸光度值(0.978±0.091)明显低于对照组(1.182± 0.074,P=0.000)。转染组CDC25B(通过targetscan发现的miR-148a靶基因)蛋白表达较对照组明显降低。
结论miR-148a在胃癌组织中的表达明显低于癌旁组织;其具有抑制胃癌细胞增殖的作用,CDC25B可能是miR-148a发挥抑癌作用的靶基因。