【摘 要】
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目的比较HBV共价闭合环状DNA(Covalently closed circular DNA, cccDNA) Real-time PCR检测方法。方法选择文献中常用的普通Taq-Man探针及Taq-Man MGB探针两种检测方法，合成引物及探针，制备质粒标准品，提取乙肝患者血清及肝组织标本HBV DNA，分别用质粒安全ATP依赖的DNA酶(Plasmid-safe ATP-dependent
【机 构】
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050051 石家庄，河北医科大学第三医院肝胆外科,050051 石家庄，河北医科大学第三医院肝胆外科,102206 北京，中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,050051 石家庄，河北医科大学第三
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目的比较HBV共价闭合环状DNA(Covalently closed circular DNA, cccDNA) Real-time PCR检测方法。
方法选择文献中常用的普通Taq-Man探针及Taq-Man MGB探针两种检测方法，合成引物及探针，制备质粒标准品，提取乙肝患者血清及肝组织标本HBV DNA，分别用质粒安全ATP依赖的DNA酶(Plasmid-safe ATP-dependent DNase, PSAD)酶切，进行敏感性、特异性及重复性检测验证。
结果两种检测方法扩增质粒标准品均有良好线性关系(R2 0.989和0.976)，重复性良好(CV<4%)；检测PSAD酶切前后质粒、血清及肝组织HBV cccDNA均有良好特异性；检测相同浓度样品时普通Taq-Man探针Ct值较Taq-Man MGB探针略低。
结论两种方法均可用于HBV cccDNA检测，本实验所用的普通Taq-Man探针较Taq-Man MGB探针敏感性略高；MGB探针本底更低。实际工作中可根据需求选择适宜的探针。
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