【摘 要】
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目的：通过多拷贝克隆技术实现水蛭素（Hirudin）基因在巴斯德毕赤酵母中的高效分泌表达。方法：利用基因重组技术,从pPIC9-Hirudin中扩增α-facor-Hirudin插入到载体pAO815中,并构建
【机 构】
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天津医科大学代谢病医院内分泌研究所、卫生部激素与发育重点实验室
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目的：通过多拷贝克隆技术实现水蛭素（Hirudin）基因在巴斯德毕赤酵母中的高效分泌表达。方法：利用基因重组技术,从pPIC9-Hirudin中扩增α-facor-Hirudin插入到载体pAO815中,并构建pAO815-（α-Hirudin）n多拷贝重组质粒,转化毕赤酵母GS115后进行诱导表达,并鉴定表达产物活性。结果：PCR证实成功构建了水蛭素多拷贝毕赤酵母表达载体pAO815-（α-Hirudin）n,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳证实能成功高效分泌重组水蛭素,活性测定表明表达的水蛭素有良好的抗凝
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