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目的：构建抑制PTEN基因表达的pSUPER RNA干扰（RNAi）载体pSUPER PTEN并鉴定其功能。方法：化学合成一对编码短发夹RNA序列,靶向细胞PTEN基因的寡核苷酸链,退火,克隆到经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSU-PER质粒上,构建重组RNAi质粒pSUPER PTEN,通过双酶切鉴定及测序分析验证构建效果;将构建正确的质粒转染肝癌HepG2细胞,免疫印迹和qPCR检测HepG2中PTEN的表达及其对AKT信号通路的影响。结果：双酶切鉴定及测序结果分析表明碱基成功插入pSUPER PTE