【摘 要】
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目的探讨p53凋亡刺激蛋白2（apoptosis stimulating protein 2 of p53,ASPP2）调控葡萄糖调节蛋白78（glucose-regulated protein 78,GRP78）在N-硝基-L-精氨酸甲酯（L-nitroarginine m
【机 构】
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宁夏医科大学基础医学院; 宁夏医科大学总医院产前诊断中心; 宁夏医科大学临床医学院;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(No 81760270);宁夏回族自治区重点研发计划一般项目(No 2018BEG03026);宁夏高等学校一流学科建设(宁夏医科大学西部一流建设学科基础医学)资助项目(No NXYLXK2017B07)
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目的探讨p53凋亡刺激蛋白2（apoptosis stimulating protein 2 of p53,ASPP2）调控葡萄糖调节蛋白78（glucose-regulated protein 78,GRP78）在N-硝基-L-精氨酸甲酯（L-nitroarginine methyl ester,L-NAME）诱导胎盘滋养细胞凋亡中的作用,为临床研究妊娠期高血压疾病提供理论依据。方法体外培养HTR-8/SVneo人胎盘滋养细胞,分为对照组(0μmol·L-1L-NAME)和L-NAME组(100μmol·L-1LNAME),干预48 h后,分别采用Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术和吖啶橙/溴化乙锭染色,检测胎盘滋养细胞凋亡水平的变化;运用Western blot检测caspase-12、GRP78和ASPP2的蛋白变化; ASPP2干扰腺病毒感染人胎盘滋养细胞后,采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测ASPP2的mRNA表达水平,Western blot检测GRP78的蛋白表达水平;给予100μmol·L-1 L-NAME干预48 h后,Western blot和免疫荧光分别检测caspase-12和GRP78的蛋白表达。结果与对照组相比,L-NAME组胎盘滋养细胞凋亡水平明显增加（P <0. 05）;吖啶橙染色显示,与对照组相比,L-NAME组细胞多数呈现鲜亮的橙色,晚期凋亡细胞数明显增加;同时caspase-12、GRP78和ASPP2蛋白的表达明显增加（P <0. 05,P <0. 01）;干扰ASPP2后,caspase-12和GRP78蛋白表达明显降低（P <0. 05）。结论下调ASPP2可降低GRP78的表达,进而抑制L-NAME诱导的胎盘滋养细胞凋亡。
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