论文部分内容阅读
目的:构建针对人caspase-8基因mRNA的siRNA表达载体,并观察其对转染细胞中的caspase-8的抑制作用。方法:化学合成用于产生针对caspase-8的发夹状RNA的寡核苷酸,将合成的寡核苷酸链退火形成双链,连接人经Hind Ⅲ和BglⅡ双酶切后的pSUPER真核表达载体。对重组质粒进行酶切分析和测序鉴定。通过脂质体介导,把重组质粒瞬时转染人HeLa细胞,RT-PCR、Western blot以及immunofluorescence staining检测其对mRNA和蛋白表达的干涉效果。结果