【摘 要】
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目的通过激光共聚焦技术,观察鼻息肉体外培养上皮细胞在3种不同固定剂作用下的免疫荧光染色效果,探讨不同固定剂对免疫荧光染色结果的影响,从而选择最佳固定方法。方法用酶消
【机 构】
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首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉头颈外科,北京市耳鼻咽喉科研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金重点项目(81630023);国家重点研发计划(2016YFC0905200);教育部长江学者及创新团队发展计划(IRT13082);北京市医院管理局使命人才计划(SML20150203);北京市自然科学基金面上项目(7172053)~~
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目的通过激光共聚焦技术,观察鼻息肉体外培养上皮细胞在3种不同固定剂作用下的免疫荧光染色效果,探讨不同固定剂对免疫荧光染色结果的影响,从而选择最佳固定方法。方法用酶消化法分离培养鼻息肉上皮细胞,接种培养7 d后,分别用4%(质量分数)多聚甲醛(paraformaldehyde,PFA)、等体积甲醇丙酮混合液及甲醇室温固定,1%(体积分数)Triton X-100透膜,山羊血清封闭,滴加一抗4℃过夜,滴加相应荧光二抗,含DAPI封片剂封片,激光共聚焦显微镜观察。结果等量甲醇丙酮混合液及甲醇对标记的4个标记蛋白
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