Raptor对髓系细胞破骨分化与骨吸收的抑制作用

来源 :国际医药卫生导报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jordanfandemin
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)相关调节蛋白(regulatory associated protein of mTOR,Raptor)对小鼠髓系细胞破骨分化与骨吸收的影响。方法:本研究为随机对照试验,于2020年1月至2021年6月,选取健康B6/C57小鼠10只,随机分为敲除组与对照组,每组5只。其中敲除组通过基因敲除构建髓系细胞特异性敲除Raptor小鼠模型。两组小鼠正常饲养后处死通过试剂盒分离髓系细胞,并通过RANKL诱导形成破骨细胞。通过免疫印迹试验(Western blot)检测破骨分化相关基因转录因子(spi-1 proto-oncogene,PU.1)、组织蛋白酶K(cathepsin K,CTSK)以及Fos蛋白(c-Fos)的蛋白水平;通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测破骨分化相关基因PU.1、CTSK、c-Fos的mRNA水平;通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中骨吸收指标I型胶原C端肽(C-telopeptide of type I,CTXI)、I型胶原N端肽(N-telopeptide of type I,NTX1)及尿羟脯氨酸(U-Hydroxyproline,U-HYP)评估骨吸收情况。结果:Western blot结果显示,敲除Raptor后小鼠髓系细胞中破骨分化相关基因PU.1、CTSK、c-Fos的蛋白表达量显著降低,RT-PCR结果显示细胞中PU.1、CTSK、c-FosmRNA表达水平的变化与Western blot结果趋势一致;ELISA结果显示,相比对照组,Raptor敲除小鼠血清CTXI[(185.53±36.69)pg/ml比(124.58±25.77)pg/ml,n t=3.040,n P=0.016]、NTX1[(2.89±0.37)μg/L比(2.21±0.42)μg/L,n t=2.717,n P=0.026]及U-HYP[(20.51±2.85)μg/L比(14.49±1.84)μg/L,n t=3.968,n P=0.004]表达量显著降低。n 结论:敲除Raptor能够抑制小鼠髓系细胞破骨分化与骨吸收,证实TOR相关调节蛋白Raptor在破骨细胞分化与骨吸收中发挥关键作用。“,”Objective:To investigate the effects of mammalian target of rapamycin mTOR related regulatory protein Raptor on osteoclast differentiation and bone resorption in mouse myeloid cells.Methods:This study was a randomized controlled trial. From January 2020 to June 2021, ten healthy B6/C57 mice were selected and randomly divided into a knockout group and a control group, with 5 mice in each group. In the knockout group, the myeloid cell-specific knockout Raptor mouse models were constructed by gene knockout. After normal feeding, the mice in both groups were sacrificed and their myeloid cells were isolated by the kit, and the osteoclasts were induced by RANKL. The protein levels of osteoclast differentiation related genes spi-1 proto-oncogene (PU.1), cathepsin K (CTSK), and c-Fos were detected by Western blot. The MRNA levels of osteoclast differentiation related genes PU.1, CTSK, and C-Fos were detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). The C-telopeptide of type I (CTXI), N-telopeptide of type I (NTX1), and U-Hydroxyproline (U-HYP) in serum were detected by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to evaluate the bone resorption.Results:The Western blot results showed that the protein expression levels of osteoclast differentiation related genes PU.1, CTSK, and C-FOS in the mice\'s myeloid cells were significantly decreased after Raptor knockout. The RT-PCR results showed that the expression levels of PU.1, CTSK, and C-FOs mRNA in the cells were consistent with the trend of Western Blot results. The ELISA results showed that the expressions of CTXI [(185.53±36.69)pg/ml vs.(124.58±25.77)pg/ml,n t=3.040, n P=0.016], NTX1 [(2.89±0.37)μg/L vs. (2.21±0.42)μg/L,n t=2.717, n P=0.026], and U-HYP [(20.51±2.85)μg/L vs.(14.49±1.84)μg/L,n t=3.968, n P=0.004]in the serum of the Raptor knockout mice were significantly decreased.n Conclusion:Raptor knockout can inhibit osteoclast differentiation and bone resorption of myeloid cells in mice, suggesting that Raptor plays a key role in osteoclast differentiation and bone resorption.
其他文献
目的:探析三阴性乳腺癌(TNBC)应用依托咪酯结合快速康复外科(ERAS)理念对其术后苏醒时间、认知功能的影响。方法:回顾性分析选择南阳医学高等专科学校第一附属医院2020年6月至2021年7月就诊的70例TNBC患者,根据麻醉用药方案不同将患者分为两组各35例。观察组年龄(35.67±4.21)岁,肿瘤长径(1.87±0.24)cm;对照组年龄(35.59±4.27)岁,肿瘤长径(1.89±0.23)cm。两组均进行标准TNBC手术治疗,基于ERAS理念加强围手术期管理,对照组联合丙泊酚麻醉,观察组在对
目的:探究乳腺癌患者救治全程不同时期的照顾者照护体验及阶段特异性支持性照护需求。方法:采用现象学质性研究设计,应用目的抽样法,2019年10月至2020年2月于上海中医药大学附属龙华医院乳腺科以10例乳腺癌患者照顾者为研究对象进行半结构式访谈,其中男7例、女3例,年龄30~80岁,采用Colaizzi现象学七步分析法分析资料。结果:(1)乳腺癌患者照顾者治疗期的照护体验:诊断初期迷茫无助,就诊经历辗转反复;住院期间煎熬紧张,内心情绪波动较大;确诊入院心态崩溃,亟需增强心理支持;住院期间知识缺乏,知识学习较
目的:探讨肛周脓肿切开引流术后瘘管形成的影响因素。方法:采用观察性研究回顾性分析2017年12月至2019年12月盘山县人民医院收治的60例肛周脓肿行切开引流术患者的临床资料(性别、年龄、脓肿类型、脓肿位置以及术后是否规范应用抗菌药物),所有患者行切开引流术治疗,术后随访半年,统计术后是否形成瘘管,根据是否形成瘘管分为形成瘘管组和未形成瘘管组,分析肛周脓肿切开引流术后瘘管形成的影响因素。结果:纳入的60例患者中男30例、女30例,年龄(46.68±3.75)岁,肛周皮下脓肿30例、坐骨直肠窝脓肿16例、括
目的:分析复方利多卡因乳膏致儿童高铁血红蛋白血症的临床特点和转归。方法:总结1例复方利多卡因乳膏致儿童高铁血红蛋白血症患儿的临床资料,并复习相关文献。结果:患儿,女,3岁1个月。因烫伤增生性瘢痕欲行激光治疗于2021年8月23日至深圳市儿童医院就诊,外用复方利多卡因乳膏局麻后,出现局部皮肤潮红并频繁抽搐。考虑复方利多卡因乳膏致高铁血红蛋白血症。给予止惊、供氧、亚甲蓝静滴治疗后患儿发绀逐渐缓解,观察1 h后精神反应可,复查高铁血红蛋白2.1%,予离院。查阅中文文献仅有4例儿童病例报道,均为皮肤科外用复方利多
目的:采用网状meta分析方法评价不同针灸结合康复疗法治疗膝骨性关节炎(KOA)的有效性。方法:计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI)、中国生物医学文献数据库(China Biology Medicine disc,CBM)、万方数据库(WanFang Data)、重庆维普中文科技数据库(VIP)、PubMed、Embase、The Cochrane Library中公开发表的针灸与康复疗法联合治疗KOA的随机对照试验,时间限定为从建库至2021年1月1日,经筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后
目的:分析比较同一养殖环境下淡水龟和陆龟尿液挥发性化学成分组成及其抗菌性活性。方法:于2019年,采用古文献方法获取乌龟尿液,乙醚超声萃取挥发性成分,GC-MS分析对比其化学组成,通过抑菌环法、悬液定量法研究3种乌龟尿液对常见4种菌的抑菌能力。结果:黄喉拟水龟尿液中分离鉴定34个挥发性化学成分,三线闭壳龟尿液中分离鉴定25个挥发性化学成分,凹甲陆龟尿分离鉴定了37个化合物。3种乌龟尿液挥发性成分对4种常见细菌均有不同程度的抑制作用,黄喉拟水龟尿对金黄色葡萄球菌和伤寒沙门氏菌抑菌作用较好,三线闭壳龟尿对大肠
目的:探讨过表达微小RNA(miRNA,miR)-4731-5p对结直肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法:将miR-4731-5p类似物(miR-4731-5p组)和阴性对照miR-NC(miR-NC组)转染至结直肠癌HT-29细胞。实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测HT-29细胞miR-4731-5p的相对表达量。采用集落形成实验和流式细胞术分别检测HT-29细胞的增殖水平和凋亡情况。生物信息学软件miRTarBase预测miR-4731-5p的靶基因。qRT-PCR和West
目的:探讨内皮素-1(ET-1)对重症手足口病(HFMD)合并神经源性肺水肿(NPE)的临床意义。方法:选取2019年1月至2020年11月在河南省儿童医院住院治疗的HFMD患儿126例为病例组(男70例、女56例),根据病情轻重程度分为普通组(57例)、重症无NPF组(41例)、重症合并NPF组(28例)。同期选取30例健康体检儿童作为对照组(男13例、女17例)。观察并对比儿童血清及脑脊液ET-1水平。结果:血清和脑脊液ET-1水平在重症合并NPE组明显升高,差异均有统计学意义(均n P<0
目的:探讨上调微小RNA(microRNA)-1322(miR-1322)对胃癌SGC7901细胞凋亡及迁移的影响,分析其作用机制。方法:于2020年8月至2021年6月构建miR-1322慢病毒载体,感染胃癌SGC7901细胞为miR-1322组,感染空白慢病毒载体为对照组。实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)分析SGC7901中miR-1322的表达。流式细胞术和Transwell实验检测上调miR-1322对SGC7901细胞凋亡和迁移的影响。生物信息学预测miR-1322的靶基因。qRT-PC
目的:评价桥接钢板治疗钩掌关节损伤的疗效。方法:回顾性分析2016年至2020年期间山东第一医科大学第一附属医院应用桥接钢板内固定治疗钩掌关节损伤的12例患者,其中男性9例,女性3例,年龄为(37±21)岁。术后6个月测量并比较患侧与健侧的腕关节活动度及手部握力。结果:12例患者切口均一期愈合,未出现骨折不愈合、感染、肌腱粘连和神经损伤等并发症。虽然患侧腕关节屈伸活动度及握力与健侧比较差异均有统计学意义[(71.1±5.3)°比(76.4±6.2)°,(57.7±2.8)°比(62.1±2.7)°,(40