烟曲霉壳聚糖酶在毕赤酵母中的分泌表达

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为了筛选高效表达壳聚糖酶的毕赤酵母菌株。重组质粒pPIC9K-CSN经Sal I线性化后,电击转化毕赤酵母GS115,表型筛选Mut^+转化子,PCR鉴定后,用G418梯度浓度筛选多克隆子,用甲醇诱导摇瓶分泌表达。经PCR分析,质粒转到宿主菌GS115,在G418为4mg/mL时,筛选到了多克隆子,经SDS—PAGE分析表明分泌表达蛋白的相对分子量约为25kDa,酶活为14.59U/mL。
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