间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)来源于中胚层的多潜能干细胞,具有分化为成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞等终末分化细胞的能力。本实验研究了hedgehog信号通路的特异性抑制剂环巴胺(cyclopamine,CPA)对牛(Bos taurus)脂肪间充质干细胞(adipose mesenchymal stem cells,AMSCs)的细胞分裂周期及成骨与成脂诱导分化的影响。首先获得牛AMSCs,然后用CPA处理AMSCs,用流式细胞仪分析和Real-time PCR方法检测CPA对细胞周期及定向分化过程中关键基因表达的影响。结果显示,CPA以剂量依赖的方式影响AMSCs的细胞周期进程,并且引起细胞停滞在G0/G1期;后经成脂和成骨诱导后,细胞形态没有显著变化;但是用Real-time PCR的方法检测诱导分化过程中成脂分化关键基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)与成骨分化关键基因成骨细胞转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)的表达量显示,CPA对两种分化相关基因的表达量都有显著影响:在成脂分化过程中,4 d后处理组的PPARγ比对照组的表达量显著提高(P<0.01);在成骨分化过程中,处理组Runx的表达量从开始一直显著低于对照组(P<0.01)。结果表明,CPA处理对成脂与成骨没有形态学方面的影响,但是能够引起关键基因表达量的显著变化。研究结果为研究hedgehog信号通路在间充质干细胞的增殖与分化过程中的作用提供参考依据。