【摘 要】
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目的探讨小干扰RNA（siRNA）靶向抑制去泛素化酶3（Dub3）基因表达对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法优化siRNA转染条件,将2条靶向抑制Dub3基因的siRNA载体片段（si
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目的探讨小干扰RNA（siRNA）靶向抑制去泛素化酶3（Dub3）基因表达对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法优化siRNA转染条件,将2条靶向抑制Dub3基因的siRNA载体片段（siRNA-1、siRNA-2）分别高效转染人鼻咽癌CNE-2细胞,同时设转染无义序列的空转染组及无任何处理的对照组。分别于转染24、48、72、96 h后采用实时定量PCR（q PCR）检测Dub3表达水平以筛选抑制率高的感染载体用于后续试验。噻唑蓝法检测各组转染24、48、72、96 h后的增殖抑制率,流式细胞术检测各组转染48、96 h后的细胞凋亡和细胞周期情况,采用Western blotting检测各组转染96 h后细胞分裂周期蛋白25A（Cdc25A）的表达情况。结果转染组的Dub3 mRNA水平均低于空转染组和对照组（P<0.05）,且选择干扰效率高的siRNA-1载体进行功能学研究;与其余两组相比,抑制组转染后的增殖抑制率、凋亡率及caspase-3活化率均升高,且G0/G1期细胞比例升高,但S期和G2/M期细胞比例均降低,以上差异均有统计学意义（P<0.05）;抑制组转染后的Cdc25A水平降低,与空载体组和对照组的差异有统计学意义（P<0.05）。空载体组和对照组以上指标的差异均无统计学意义（P>0.05）。结论通过siRNA抑制Dub3基因表达可抑制鼻咽癌细胞的增殖并诱导凋亡和细胞周期阻滞,对鼻咽癌的防治有一定价值。
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