【摘 要】
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目的建立化学发光酶免疫法(chemiluminescent enzyme immunoassay, CLEIA)测定动物源食品中呋喃唑酮代谢物的分析方法。方法通过使用N-羟基琥珀酰亚胺酯法将衍生的CPAOZ半抗
【机 构】
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山西大学生命科学学院; 山西省市场监督管理局;
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目的建立化学发光酶免疫法(chemiluminescent enzyme immunoassay, CLEIA)测定动物源食品中呋喃唑酮代谢物的分析方法。方法通过使用N-羟基琥珀酰亚胺酯法将衍生的CPAOZ半抗原与卵白蛋白(ovalbumin, OVA)缀合以合成包被抗原,优化CLEIA酶免疫方法的主要条件。对CLEIA酶免疫法的灵敏度、特异性、精密度及准确度进行评价,并就准确度指标同国家标准中的液相色谱串联质谱法进行对比分析。结果包被原和单克隆抗体稀释倍数分别为4000倍和1600倍, 1%脱脂乳封闭,竞争时间30 min, HRP-IgG孵育时间60 min时为最佳条件。CLEIA的线性方程为Y=-0.357X+1.459(r~2=0.984), IC50为0.486 ng/mL,线性范围为0.070~3.362 ng/mL。回收率在87.9%~92.6%之间,批内和批间变异系数分别为3.6%~7.5%和3.2%~6.3%。结论该方法简单,快速,可用于实验室或现场动物源性食品的AOZ筛选。
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