探讨细胞穿透肽PEP-1介导血红素加氧酶-1对急性百草枯(PQ)中毒大鼠肾损伤的影响。
方法选126只成年健康SD大鼠(雌雄不拘)随机分为对照组、染毒组和干预组各为42只。染毒组给予20%百草枯稀释液1 ml(25 mg/kg),腹腔内一次性注射。对照组大鼠给予等量0.9%氯化钠溶液腹腔内注射,干预组在染毒后通过左侧髂静脉给予1 mg融合蛋白PEP-1/HO-1。于1、6、12、24、36、48、72 h,每组各取6只,在乙醚麻醉下,开腹,由腹主动脉采血,观察比较血浆中尿素氮(Bun)、肌酐(Cr)含量的变化,留取肾组织标本,一部分标本制备匀浆,分别测定肾组织中丙二醛(MDA)含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)的活力;另一部分标本,用免疫组织化学染色法检测其HO-1蛋白的表达水平。
结果与对照组比较,染毒组和干预组6~72 h血浆Bun、Cr含量明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与染毒组比较,干预组6~72 h血浆Bun、Cr含量明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。染毒组1~48 h及干预组1~36 h MDA含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01)。干预组1、6、12、24及36 h MDA含量较染毒组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,染毒组1~36 h T-SOD活力明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。干预组各时段T-SOD活力均较染毒组明显升高,差异有统计学意义(p<0.01)。肾组织免疫组化检测显示,各时间段染毒组和干预组较对照组HO-1蛋白的表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);干预组各时段HO-1表达较染毒组增强,差异有统计学意义(P<0.01或0.05)。
结论细胞穿透肽PEP-l可以将HO-l成功导入肾组织细胞内,导入的HO-1通过抑制脂质过氧化反应减轻PQ中毒引起的肾损伤。