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本研究通过鉴定筛选得到一株高产β-葡萄糖苷酶的长白山虫草属真菌蛹虫草。通过研究碳源、氮源及pH值对菌株产β-葡萄糖苷酶、α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶、虫草酸与生物量的影响规律,从而获得高产生物活性物质的培养条件,并对蛹虫草转化人参皂苷Rg1与Rc的转化路径与转化率进行了研究。采用紫外检测法测定β-葡萄糖苷酶与α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶活力,以高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS)鉴定转化产物中人参皂苷的组成,利用高效液相色谱法(HPLC)测定虫草素含量及人参皂苷的转化率。结果表明:蛹虫草在碳源为纤维二糖,氮源为牛肉膏,pH值为8,培养120 h的条件下有较高β-葡萄糖苷酶活力(74.70 ± 0.09 U/mL)。在碳源为乳糖,氮源为蛋白胨,pH 值为4,培养72 h的条件下有最高的α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶活力(11.55 ± 0.01 U/mL)。蛹虫草转化人参皂苷Rg1的路径为Rg1→Rh1和Rg1→F1,转化Rc路径为Rc→Rd→Rg3→CK和Rc→CMc。经过168 h的转化人参皂苷Rg1的转化率54.9%,Rc的转化率达到83.44%。本研究为提高药食两用真菌蛹虫草生物转化人参皂苷效率提供了理论基础,也为蛹虫草和人参食品、药品开发提供了一定理论支持。