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本研究以嗜热链球菌（S．thermophilus）染色体DNA为模板，利用PCR技术扩增出胸苷酸合成酶（thymidylate synthase ,thyA）基因，将其克隆入T载体中，转化DH5仅，筛选阳性克隆，提取质粒，进行酶切鉴定，PCR扩增鉴定，进行测序，与已知序列进行同源性比较，结果表明成功克隆了thyA基因，全长900bp，与国外报道的S．thermophilus ATCCl9258 thyA基因同源性达99．9％。这为构建以thyA基因为选择压力的非抗生素抗性载体提供了理论依据。