【摘 要】
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根据GenBank上鹅源新城疫病毒NA-1株M基因的序列,在保守区域设计并合成了1对引物,采用荧光嵌合法(SYBR GreenⅠ)建立了检测鹅源新城疫病毒的实时荧光定量PCR(real-time PCR)
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(30571375,30771606)
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根据GenBank上鹅源新城疫病毒NA-1株M基因的序列,在保守区域设计并合成了1对引物,采用荧光嵌合法(SYBR GreenⅠ)建立了检测鹅源新城疫病毒的实时荧光定量PCR(real-time PCR)。以鹅源新城疫病毒NA-1株反转录产物cDNA为标准品,通过优化反应条件,建立了标准曲线,并进行了融解曲线分析。结果,标准曲线的Ct值检测范围为23~36,相关系数(r2)为0.992;无引物二聚体及非特异性产物,且Tm=(83±0)℃。结果表明,建立的检测鹅源新城疫病毒实时荧光定量PCR方法特异性强、灵敏性高,能为以后快速诊断鹅源新城疫病毒提供有效保障。
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