草鱼呼肠孤病毒外衣壳蛋白VP7重组疫苗的构建及其免疫效力评价

来源 :湖南农业大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:yjfu
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为探明呼肠孤病毒(GCRV)外衣壳蛋白VP7基因工程亚单位疫苗产生的抗体效价水平和免疫保护力,用RT—PCR方法,从GCRV中扩增到印7基因片段,并克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,得到重组质粒pET—VP7,酶切鉴定后,将pET-VP7转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,产生的重组蛋白经变性和复性后,按0.5、1.0、2.0mg/尾的注射剂量分为3个免疫组,以等体积的氢氧化铝为佐剂进行注射。经SDS—PAGE电泳分析,发现了相对分子质量为34000的蛋白表达带;Western Blo
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