人脂肪来源干细胞对小鼠压疮愈合影响的实验研究

来源 :中国修复重建外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hj0411
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目的探讨人脂肪来源干细胞(human adipose-derived stem cells,hADSCs)对小鼠压疮创面愈合的影响。方法取自愿捐赠的人脂肪组织,采用机械分离联合胶原酶消化法获取hADSCs并传代。取第3代细胞行成骨、成脂、成软骨分化以及流式细胞仪鉴定。取健康自愿者捐赠的外周血,采用离心法制备富血小板血浆(platelet rich plasma,PRP),并行血小板计数。取45只C57BL/6小鼠采用磁铁夹压法于背部制备压疮模型,随机分为3组(n=15);hADSCs组、PRP组及对照组创面分别注射100μL经携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记后的hADSCs(1×106个)、人PRP、PBS。注射后观察压疮创面愈合情况,5、9、13 d计算创面愈合率;5、11、21 d取标本行HE染色、Masson染色以及CD31、S100免疫组织化学染色,观察创面血管、神经再生情况。hADSCs组于11 d时荧光示踪法观察细胞定植及成活情况。结果经诱导分化及流式细胞仪鉴定分离培养细胞为hADSCs。PRP血小板计数显著高于正常外周血(t=5.781,P=0.029)。大体观察,注射后hADSCs组创面愈合优于PRP组及对照组,5、9、13 d,hADSCs组创面愈合率明显高于PRP组及对照组(P<0.05)。组织学观察示,与PRP组及对照组相比,hADSCs组炎性细胞浸润、炎性反应明显减轻,胶原沉积明显增多,且21 d时可见皮肤附属器再生;注射后各时间点,hADSCs组胶原表达量均显著高于PRP组及对照组(P<0.05)。免疫组织化学染色示,各时间点hADSCs组新生血管数、S100阳性细胞百分比均明显多于PRP组和对照组(P<0.05)。荧光示踪法显示注射11 d后hADSCs可定植于创面并成活。结论局部移植的hADSCs通过促进血管新生和神经再生,进而促进小鼠压疮创面愈合、提高愈合质量。
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