构建人CD23及其反义RNA的逆转录病毒表达重组体

来源 :中山医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：coolsun070279

【摘要】

：

【作者】

：

王斌曹丽萍

【机构】

：

中山医科大学免疫学教研室

【出处】

：

中山医科大学学报

【发表日期】

：

1996年2期

【关键词】

：

抗原 RNA 受体核酸杂交逆转录病毒克隆分子 antigens CD RNA antisense receptor IgE nucleic

【基金项目】

：

国家自然科学基金

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利用ＣＤ２３ｃＤＮＡ全基因克隆ｐＵＣＤ９７６，分别以限制性内切酶ＥｃｏＲＩ和ＸｂａＩ酶切该重组质粒ＤＮＡ，回收１．０ｋｂ的ＣＤ２３ｃＤＮＡ全基因、ＨｉｎｄⅢ酶切后回收３’端６０７ｂｐ的结合区段基因以及ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎｄⅡ酶切回收５’端４０３ｂｐ的调控区段基因。将各回收片段先以Ｋｌｅｎｏｗ酶补平后，插入已补平的ｐＺＩＰ逆转录病毒载体ＢａｍＨⅠ单切点，利用地高辛素标记的ＣＤ２３ｃＤＮＡ全基因探针，以斑点核酸杂交筛选逆转录病毒重组体，结合用限制性内切酶ＢａｍＨＩ和／或ＢｇｌⅡ酶切鉴定插入方向，最终获得正、反向

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