【摘 要】
：
从分泌抗人红细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞3F5中提取总RNA,逆转录成cDNA,用合成的寡核苷酸引物通过PCR扩增和克隆单抗的轻、重链可变区基因,用双脱氧核苷酸链终止法分析核苷酸
论文部分内容阅读
从分泌抗人红细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞3F5中提取总RNA,逆转录成cDNA,用合成的寡核苷酸引物通过PCR扩增和克隆单抗的轻、重链可变区基因,用双脱氧核苷酸链终止法分析核苷酸序列,采用PCR拼接法构建单链抗体基因,并插入原核表达载体PEt-28a,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后表达. 序列分析表明所克隆的VL、VH分别属于鼠Ig Kappa轻链IV亚组和Ig 重链Ⅱ亚组.VH、VL 基因均含正确的框架结构,构建的单链抗体基因全长750 bp,在原核系统中的表达产物经SDS-PAGE分析相对分子量约为28000.
其他文献
变溶菌素(Mutanolysin)是由球孢链霉菌(Streptomyces globisporus)的培养制备的由多种不同溶菌酶组成的粗酶液.
目的为早期诊断氟中毒提供简便的方法.方法以实验性氟中毒小鼠为实验对象,对其毛发进行扫描电镜观察.结果氟中毒小鼠毛发在扫描电镜下出现黑白条纹,鳞片角度钝化.结论氟中毒
目的:构建人钙调素(CaM)基因表达载体并在大肠杆菌DH5α中高效表达人CaM蛋白.方法:用PCR方法获得人钙调素基因Ⅲ(hCaMⅢ cDNA),将其插入表达载体pBV220,构建重组表达质粒hCaM
目的 :探讨癌基因HER2、mdm 2和C myc扩增与胃癌恶性程度、转移及预后的关系。 方法 :用差异竞争性多聚酶链反应检测胃癌原发灶、癌旁、转移淋巴结及远处脏器转移癌中HER2、m
运用SMM半固体平板法和悬滴法,检测了不同来源的青枯菌野生型菌株107株,发现30株有明显运动性的青枯菌野生型菌株,这与在科学界沿用至今已有20多年的青枯菌野生型菌株没有运
记述青海省花蝇科Anthomyiidae 2新种,即周氏泉种蝇Pegohylemyia choui, sp. nov. 及多曲草种蝇Phorbia polystrepsis, sp. nov..模式标本均存中国科学院上海昆虫研究所.
对320国道云南境内从曲靖到大理的旧线公路路域的防护植物作了初步的调查,在不同路龄的路线上选择了26个样方,统计了其植物的物种多样性,并对其中11个样方做了生物量测定.结
为了证实HPV18E6E7基因诱导的人胚食管上皮永生化细胞 (SHEE) 6 1代 (SHEE6 1)部份细胞 (SHEE6 1A)已经恶性转化 ,以寻找监控细胞早期恶性转化的方法。对培养的SHEE第 10代 (
本文证明对乘积图G×Pn和G×Cm,若G∈C1T,则G×Pn∈C1T,G×C2m∈C1T和G×Cm∈C1TC2T;从而证明了乘积图Pr1×Pr2...×Pm∈C1r,Cr1×Cr2...×Cm∈C1T∪C2T.由此证明了对于这些
为了了解小剂量重离子辐射诱导小鼠睾丸结构的适应性反应,采用小剂量(0.05Gy)16O8+离子照射B6C3F1雄性小鼠睾丸.4h后,再给予2Gy16O8+离子照射.照射后第35天取材在光镜下观察