【摘 要】
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目的:评价Hin47-HiD融合蛋白作为b型流感嗜血杆菌结合疫苗新型载体的可行性。方法:应用重叠延伸PCR法构建Hin47-HiD融合基因,克隆至表达载体p ET-9a,并转化至大肠杆菌中诱导
【机 构】
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天津科技大学,天津康希诺生物技术有限公司
【基金项目】
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国家“重大新药创制”科技重大专项(2015ZX09102009)
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目的:评价Hin47-HiD融合蛋白作为b型流感嗜血杆菌结合疫苗新型载体的可行性。方法:应用重叠延伸PCR法构建Hin47-HiD融合基因,克隆至表达载体p ET-9a,并转化至大肠杆菌中诱导表达。融合蛋白经柱层析纯化后与Hib多糖结合,免疫小鼠并用间接ELISA法测定小鼠血清中针对Hib多糖和Hin47、HiD蛋白的抗体滴度。结果:本研究表达、纯化了Hin47-HiD融合蛋白,并制备了以该蛋白为载体的Hib结合疫苗;两针免疫后,免疫Hib-Hin47-HiD结合物的小鼠血清中的抗Hib抗体水平远高于接种Hib多糖的小鼠;此外,Hib-Hin47-HiD结合物还诱导出高水平的针对Hin47和HiD的抗体。结论:Hin47-HiD融合蛋白可以有效的提高Hib多糖的免疫原性,是一个有潜力的新型结合疫苗蛋白载体。
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