禽流感病毒同义NP蛋白的原核表达及其间接ELISA检测方法的建立

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dongmeizi1988
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为建立通用型禽流感病毒(AIV)快速检测方法,本研究将合成的同义NP(ConsNP)基因克隆于pET30a中,利用大肠杆菌系统进行原核表达,以纯化重组ConsNP蛋白作为包被抗原,建立了检测AIVNP抗体的间接ConsNP-ELISA方法,并优化了反应条件。结果表明:抗原包被量为1μg/孔;封闭剂为5%脱脂乳;一抗血清稀释度为1:200;HRP标记的兔抗鸡IgG(酶标二抗)稀释度为1:20000;阴阳性临界值为:OD490mm值〉0.239。该间接ELISA方法与其他亚型AIV阳性血清均呈阳性反应,与新城
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