【摘 要】
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目的 明确受体相互作用蛋白140 (RIP140)基因过表达对小鼠小胶质瘤细胞(BV-2)增殖、凋亡、侵袭及迁移行为的影响.方法 采用脂质体转染和G418筛选法构建RIPI40过表达的BV-2细
【机 构】
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北京大学人民医院儿科,北京大学人民医院临床分子生物研究所,北京大学人民医院生殖医学中心
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目的 明确受体相互作用蛋白140 (RIP140)基因过表达对小鼠小胶质瘤细胞(BV-2)增殖、凋亡、侵袭及迁移行为的影响.方法 采用脂质体转染和G418筛选法构建RIPI40过表达的BV-2细胞模型,用实时定量PCR及Western印迹法鉴定过表达模型构建是否成功,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞仪和Transwell小室检测RIP140过表达对BV-2细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移行为的影响.结果 成功构建RIP140过表达模型BV-2-1,BV-2-1细胞RIPI40 mRNA与蛋白表达量均高于BV-2细胞(t＝49.794,P＜0.01).细胞增殖检测显示:BV-2细胞24、48、72 h吸光度(A)值分别为1.157±0.013、1.679±0.005、2.609±0.008,BV-2-1细胞3个时间点的A值分别为0.929±0.013、1.188±0.008、1.528±0.012,BV-2-1细胞48及72 h增殖率明显低于BV-2细胞(t＝6.058、9.245,均P＜0.01).凋亡检测显示:BV-2-1细胞凋亡率明显高于BV-2细胞[(5.35±0.23)％比(3.46±0.45)％,＝6.619、P＝0.003].侵袭检测显示:BV-2-1细胞侵袭平均数多于BV-2细胞[(166±43)个比( 93±32)个,t＝3.403,P＝0.007].迁移检测显示BV-2-1细胞迁移平均数高于BV-2细胞[ (202±50)个比(101±25)个,t＝4.104,P＝0.002].结论 RIP140过表达抑制BV-2细胞增殖,促进其凋亡；RIP140过表达促进BV-2细胞的侵袭和迁移能力.
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