伏马毒素B1时间分辨荧光免疫分析超微量检测方法的建立

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目的利用稀土离子作为示踪剂,建立间接竞争时间分辨荧光免疫分析方法检测伏马毒素B(1FB1)。方法以伏马毒素B1-牛血清白蛋白(FB1-BSA)包被于固相微孔板,FB1标准品或样品中的FB1竞争结合限量的抗FB1单抗,然后用稀土离子Eu3+-羊抗鼠IgG进行示踪检测,建立伏马毒素B1-时间分辨荧光免疫分析(FB1-TRFIA)并进行方法学的考核。结果FB1-TRFIA检测灵敏度为0.05ng/ml,检测范围为FB11.0~1000ng/ml,批内、批间变异率均小于10%。添加回收实验表明玉米样品中FB1批内平均回收率为104.3%,批间平均回收率为100.7%。FB1与FB2有轻微交叉反应,FB1不与赤霉毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、T2等真菌毒素发生交叉反应,方法特异性好。结论FB1-TRFIA灵敏度高,检测范围宽,重复性、稳定性好,是一种简便、快速、经济、稳定、可进行大批量样品伏马毒素筛查的检测方法。
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