过表达α 2,3-唾液酸转移酶基因对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响

来源 :中国临床药理学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kingly1988
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目的研究过表达α2,3-唾液酸转移酶(ST3GalⅢ)基因对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响。方法构建ST3GalⅢ慢病毒表达载体,转染MDA-MB-231细胞。将转染细胞分为空白组(未转染,Mock cells,M)、对照组(转染对照慢病毒,Parent cells,P)和实验组(转染慢病毒载体,ST3GalⅢ,ST3)。用实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫印迹法检测转染后ST3GalⅢmRNA及蛋白表达,流式细胞术分析转染后ST3GalⅢ催化形成下游产物唾液酸化Lewis抗原(SLe X)变化;用细胞黏附实验、Transwell小室检测MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响。结果 RT-PCR与Western bolt显示对照组和实验组中ST3GalⅢmRNA相对表达量分别为0.91±0.04,1.85±0.08;蛋白相对表达量分别为0.94±0.04,1.96±0.10;实验组mRNA和蛋白表达分别为对照组1.84倍和1.76倍(P<0.05);实验组细胞表面SLe X含量为92.86±4.41,为对照组的1.61倍,含量明显升高(P<0.05)。细胞黏附检测结果表明,空白组、对照组和实验组的OD570nm分别为0.32±0.02,0.29±0.01和0.46±0.03;细胞侵袭能力结果表明,空白组、对照组和实验组的OD570nm分别为0.93±0.02,0.81±0.01和1.46±0.13,实验组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论过表达ST3GalⅢ基因可提高MDA-MB-231细胞侵袭能力。
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