神经酰胺对人γδT细胞和αβT细胞的诱导凋亡作用

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目的 :观察神经酰胺对人γδT细胞和αβT细胞的诱导凋亡作用。 方法 :用结核杆菌低分子多肽抗原 (Mtb Ag)和CD3单抗 (CD3mAb)分别刺激正常人外周血单个核细胞 ,获得Mtb Ag激活的T细胞 (γδT细胞为主 )及CD3mAb激活的T细胞(αβT细胞为主 ) ;用不同浓度的神经酰胺 (C2 Cer)分别作用于γδT细胞和αβT细胞 ,培养 3h后收获细胞 ,应用Annexin V FITC/PI染色 ,流式细胞术检测不同亚群T细胞的凋亡 ,应用四甲基噻唑氮蓝 (MTT)比色法检测T细胞的活性。结果 :Mtb Ag激活的T细胞中γδT细胞比例可达 70 %~ 90 % ,CD3mAb激活的T细胞中αβT细胞比例 >90 % ;与对照组比较 ,低浓度的C2 Cer(≤ 1 0 μmol/L)对人γδT细胞和αβT细胞的诱导凋亡作用和细胞活性抑制作用均不明显 (P >0 .0 5 ) ;而高浓度的C2 Cer对γδT细胞和αβT细胞的诱导凋亡作用和细胞活性抑制作用存在显著差异 :1 0 0 μmol/L的C2 Cer诱导γδT细胞、αβT细胞凋亡比例分别增加 1 0 .4 % (P >0 .0 5 )及 73.5 % (P <0 .0 1 ) ,活细胞区 (R1区 )的细胞比例分别为对照组的 88.1 % (P >0 .0 5 )和7.8% (P <0 .0 1 ) ;而 5 0 0 μmol/L时诱导γδT细胞和αβT细胞凋亡比例分别增加 71 .9%和 73.8% (P <0 .0 1 ) ,R1区的细胞比例分别为对照组的
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