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目的:通过序列优化及表达条件改进,在大肠杆菌中高效可溶性表达B型肉毒毒素保护性抗原He(Bont/B-He)。方法:对Bont/B-He基因片段优化,用大肠杆菌常用密码子替换稀有密码子,并将(C+C)含量由76.2%降至56-3%;人工合成多条具有重叠互补序列的寡核苷酸片段,采用重叠延伸PCR方法获得了Bont/B-He的全长基因,并构建了原核可溶性表达载体;将经酶切和测序鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌B121(DE3)感受态细胞,用IPTC诱导Bont/B-He的表达并进行纯化及Western印迹鉴定。