用 尺寸排阻色谱法研究蛋白质的热稳定性

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用尺寸排阻色谱ZorbaxGF-250凝胶过滤柱研究了核糖核酸酶A,马心肌红蛋白和溶菌酶的热稳定性。测定了蛋白质在尺寸排阻系统中的分配系数Kd并用荧光检测器分析了加热引起的蛋白质内源性荧光的改变,从而计算出了蛋白质的热变性转化点温度,测定了蛋白质天然态、热变性和盐酸胍诱导变性状态下的斯托期斯半径,实验结果进一步证帝了热变性后蛋白质不是呈真正的随机线状,而是保留了部分紧密的结构区域。用本方法研究了P
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