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为了考察苹果酸酶对厌氧混合酸发酵的影响，从E．coli DH5α中PCR扩增苹果酸酶（NAD＋ -dependent，E．C1．1．1．38）基因sfcA，插入质粒pTrc99a构建了表达质粒pTrc99a-sfcA，有氧和厌氧的条件下，IPTG诱导在E.coli FMJ39（1dh，pfl）中均获得大量表达。厌氧发酵结果表明，过量表达苹果酸酶会影响混合酸发酵中甲酸、乙酸、丁二酸途径。重组菌甲酸和乙醚的量分别比受体菌提高了17．58％和15．27％，丁二酸的量降低了26．87％，柠檬酸的量变化不大。实验证