抗ALT抗体间接ELISA检测方法的建立

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目的建立免疫小鼠体内抗人丙氨酸氨基转移酶(ALT)抗体的间接ELISA检测方法,以期作为融合后杂交瘤细胞株的筛选体系。方法利用人ALT为包被抗原,以1:40000稀释的辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG为二抗,采用棋盘滴定法确定抗原和对照血清(阴性、阳性)最佳工作浓度及ELISA封闭液的浓度建立ELISA体系。结果包被抗原和血清的适宜浓度或稀释度分别为1:5000和1:1000;用4%BSA封闭18h~24h效果最好。结论建立的ELISA方法稳定,简便易行,能准确检测免疫小鼠血清抗体的效价,并可用于抗ALT
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