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目的：通过基因克隆和体外转录，获得汉坦病毒汉滩型76118株及汉城型R22株s基因的RNA全长cRNA，为汉坦病毒病原学检测提供阳性定量标准品。方法：设计汉滩型76118株和汉城型R22株s基因克隆引物，PCR获得相应片段，分别克隆至含双启动子的PCRⅡ载体中，测序鉴定无误后，重组质粒分别经内切酶SpeⅠ、SacⅠ线性化，用LRNA聚合酶进行体外转录，产物经DNase处理、纯化后测定浓度，经RT-PCR验证。结果：获得汉滩型76118株及汉城型R22株s基因的cRNA片段，并可准确定量其拷贝数，76118