氡染毒小鼠骨髓细胞差异表达cDNA文库的构建和初步鉴定

来源 :中华放射医学与防护杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a753159456
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目的 构建氡染毒小鼠骨髓细胞差异表达基因的cDNA文库.方法 采用HD-3型多功能氡室对雄性BALB/c小鼠动态吸入染毒,建立实验动物模型.按照实验动物吸入氡及其子体的累积剂量分为实验组(105 WLM)和对照组(室内本底浓度,1 WLM).取骨髓细胞提取总RNA,采用SMART和抑制性消减杂交技术,构建正、反向消减cDNA文库,消减cDNA片段插入pMD18-T载体转化大肠杆菌,以含差异表达cDNA片段的菌液为模板进行巢式PCR扩增.结果 获得了完整无降解的总RNA,得到高效率的消减cDNA文库;克隆了244个有插入片段和长度在100~1100 bp之间的单克隆.结论 成功构建了氡暴露小鼠骨髓细胞差异表达的正、反向cDNA消减文库。

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