分泌人白介素-2的重组卡介苗构建、表达与鉴定

来源 :中华泌尿外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tzwizj

【摘要】

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目的构建分泌人白介素-2(IL-2)的重组卡介苗(BCG)。方法采用PCR技术从BCG基因组中扩增出Ag85B的信号肽基因序列,从pBIL-2质粒中扩增出IL-2cDNA全长序列。利用DNA重组技术将以

【作者】

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刘海涛孙晓文凡杰王丰卓见夏术阶

【机构】

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上海交通大学附属第一人民医院泌尿外科,上海交通大学泌尿外科研究所

【出处】

：

中华泌尿外科杂志

【发表日期】

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2006年S2期

【关键词】

：

膀胱肿瘤白细胞介素-2 卡介苗 Bladder neoplasms Interleukin-2 BCG

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目的构建分泌人白介素-2(IL-2)的重组卡介苗(BCG)。方法采用PCR技术从BCG基因组中扩增出Ag85B的信号肽基因序列,从pBIL-2质粒中扩增出IL-2cDNA全长序列。利用DNA重组技术将以上两个片段插入质粒pMV261结核杆菌HSP60启动子下游,构建一个分泌型的卡介苗穿梭表达质粒pMSIL-2。利用电穿孔技术将质粒pMSIL-2转入BCG得到重组BCG,分别用PCR扩增和Western blotting检测重组BCG菌体和培养上清中IL-2的DNA和蛋白表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检

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