【摘 要】
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利用多聚赖氨酸(poly-lysine)对同源二聚体肌酸酶进行化学修饰,研究该法对酶稳定性的影响。选用L9(34)正交试验方案,研究不同修饰条件对修饰酶的催化效率和热稳定性的影响,确
【机 构】
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江南大学工业生物技术教育部重点实验室
【基金项目】
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江苏省优青项目(BK20160053),江苏省产学研项目(BY2016022-40)
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利用多聚赖氨酸(poly-lysine)对同源二聚体肌酸酶进行化学修饰,研究该法对酶稳定性的影响。选用L9(34)正交试验方案,研究不同修饰条件对修饰酶的催化效率和热稳定性的影响,确定多聚赖氨酸修饰肌酸酶(CRE)的最佳条件为CRE-COOH与poly-lysine-NH2、EDC的摩尔比分别为1∶100和1∶10,pH为7.0。通过SDS-PAGE鉴定,探测多聚赖氨酸可在酶分子表面产生共价结合。修饰酶的催化动力学参数Km和kcat分别为4.75×10-2 mol/L和2.50×102
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