【摘 要】
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目的克隆人p27^kip1基因并构建其真核表达载体，为进一步研究其功能奠定基础。方法根据p27^kip1已知序列设计引物，分别在上下游引入Mlu I和Spe I酶切位点，从人肾脏组织中提取总RN
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目的克隆人p27^kip1基因并构建其真核表达载体，为进一步研究其功能奠定基础。方法根据p27^kip1已知序列设计引物，分别在上下游引入Mlu I和Spe I酶切位点，从人肾脏组织中提取总RNA，经逆转录PCR得到cDNA，亚克隆入携带GFP报告基因的pWPXL真核载体中，经筛选获得正确的克隆，并通过双酶切凝胶电泳及测序鉴定。将成功构建的质粒在脂质体介导下转染肾癌786．0细胞，并通过RT—PCR及Western-blot检测表达情况。结果克隆了人p27^kip1基因，与GenBank中序列比对无误；真
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