【摘 要】
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目的 观察体外培养的大鼠表皮十细胞(ESC)中α促黑素细胞激素(α-MSH)及黑皮质素受体1(MC1R)的表达情况. 方法 采用改良Ⅳ型胶原快速黏附法培养大鼠ESC,倒置相差显微镜下观察细胞生长形态变化,并采用免疫荧光法和流式细胞仪分别观察ESC标志物细胞角蛋白19(CK19)和整合素β1、整合素α6和CD71表达,通过免疫荧光法检测ESC中α-MSH的表达以及ESC标志物与MC1R共染的表达.
【机 构】
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435000湖北省黄石市中心医院(湖北理工学院附属医院)皮肤科,第三军医大学大坪医院野战外科研究所,第三军医大学大坪医院野战外科研究所,南华大学附属郴州医院烧伤整形外科,广东省清远市人民医院烧伤整形美
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目的 观察体外培养的大鼠表皮十细胞(ESC)中α促黑素细胞激素(α-MSH)及黑皮质素受体1(MC1R)的表达情况. 方法 采用改良Ⅳ型胶原快速黏附法培养大鼠ESC,倒置相差显微镜下观察细胞生长形态变化,并采用免疫荧光法和流式细胞仪分别观察ESC标志物细胞角蛋白19(CK19)和整合素β1、整合素α6和CD71表达,通过免疫荧光法检测ESC中α-MSH的表达以及ESC标志物与MC1R共染的表达. 结果 (1)倒置相差显微镜下可见,接种10 min后即有细胞贴壁;培养2~3d时有小克隆形成;培养4~5d,细胞增殖明显加快,克隆逐渐增大;培养7~8d,细胞生长至70% ~ 80%融合,呈铺路石状,折光性好.(2)免疫荧光法检测结果显示所分离的细胞均表达ESC标志物CK19和整合素β1,流式细胞仪检测结果显示所分离的细胞整合素α6阳性表达率为88.1%,CD71阳性表达率为1.3%.综上,所培养的细胞鉴定为ESC.(3)免疫荧光法检测结果显示ESC表达α-MSH,同时CK19与MC1R、整合素α6与MC1R荧光双染也呈阳性表达. 结论 体外培养的大鼠ESC可以表达α-MSH及MC1R。
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