hTERT重组绿色荧光表达载体的构建与表达

来源 :中国现代医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xiaxia28

【摘要】

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目的构建人端粒酶逆转录酶（hTERT）片段的真核表达质粒。方法用RT-PCR方法从肝癌组织中提取总RNA扩增出hTERT基因片段，将其连接pGEM-TEasy质粒上，将重组质粒pGEM-T-hTERT和pEGFP-C

【作者】

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李一冬赵国新曹明瑞

【机构】

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郑州大学第一临床医学院妇产科,河南省医学科学研究所免疫室

【出处】

：

中国现代医学杂志

【发表日期】

：

2008年2期

【关键词】

：

HTERT 绿色荧光表达载体真核表达 hTERT pEGFP-C3 eukaryotic expression

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目的构建人端粒酶逆转录酶（hTERT）片段的真核表达质粒。方法用RT-PCR方法从肝癌组织中提取总RNA扩增出hTERT基因片段，将其连接pGEM-TEasy质粒上，将重组质粒pGEM-T-hTERT和pEGFP-C3真核绿色荧光蛋白表达载体同时用HindⅢ和BamHⅠ双酶切后进行连接，再将重组的pEGFP-C3-hTERT基因片段转染NIH3T3细胞，经G418筛选获得稳定转染的细胞系，荧光倒置显微镜观察并检测转染细胞的hTERTmRNA表达水平。结果DNA序列分析证实了重组载体pGEM-T-hTERT

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