禽流感(AI)是威胁我国养禽业健康发展的重要疫病,为建立该病高效、便捷的检测方法进行本项研究.本试验根据禽流感病毒(AIV)保守基因(NP)序列设计引物和探针,利用反转录重组聚合酶介导恒温扩增(RT-RAA)技术对NP基因进行快速扩增并形成双标产物,扩增产物通过侧向流试纸条(LFD)进行快速检测,通过对反应时间、温度和引物浓度等条件的优化,建立了1种能够检测禽流感病毒的RT-RAA-LFD检测方法.结果显示,该方法37℃条件下,反应24 min,即可实现NP目的基因片段的有效扩增,且扩增产物可通过侧向流试纸条肉眼观察;特异性良好,与传染性支气管炎病毒(IBV),传染性喉气管炎病毒(AILV)、新城疫病毒(NDV)无核酸交叉反应;敏感性达到102 copies/μL,是常规PCR的100倍,临床检测符合率为94.8％.该方法具有特异性强、敏感性高、便捷快速等优点,为田间检测禽流感病毒提供一种可行方法.