论文部分内容阅读
目的 观察自噬是否参与压力诱导兔髓核细胞退变,探讨压力诱导髓核细胞退变机制.方法 从3月龄兔胸腰段脊柱提取兔髓核细胞培养,取第2代兔髓核细胞,1 Mpa压力环境下培养12、24、48 h.细胞活力与细胞毒性检测观察压力对细胞生长的影响,透射电镜观察压力条件下细胞的微观结构,单丹磺酰尸胺(MDC)染色观察细胞内自噬性空泡结构及自噬率,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)观察自噬相关基因在压力条件下的表达.结果 压力导致细胞衰老及死亡,透射电镜见细胞内存在自噬体结构,MDC染色后行流式细胞学检测显示12、24、48 h自噬率分别为(1.580±0.171)%、(7.930±0.252)%、(13.530±1.206)%,PCR结果显示压力诱导自噬相关基因(LC3B、Beclin-1)表达量与正常条件下表达明显增多(P<0.05),且随着压力培养时间延长,LC3B、Beclin-1表达量也明显增多(P<0.05).结论 自噬参与压力诱导细胞退变的过程,为压力诱导椎间盘髓核细胞退变的防治提供新的途径。