论文部分内容阅读
摘要:在不断实践与发展的过程中我国食品工业的进步也相当迅猛,社会各界逐步提高对食品本身食用安全的重视程度。食品安全会受到诸多客观因素的影响,食品病院微生物是其中最为直接的因素之一。严格控制食品病原微生物的含有量是促使食品安全质量得以提升的重要手段,同时这也可促使人类的饮食健康得到一定程度的保障。本文主要针对病原微生物检测技术进行研究,这对食品安全的保障有相当重要的作用与意义。
关键词:病原微生物;快速检测;分子生物学技术;生物传感器
在经济社会不断发展的大力推动之下人民群众的生活水平以及生活质量得到不同程度上的提升,人们对食品食用安全问题的重视程度也日渐提升。通过对现阶段食品安全现状进行分析后可以发现。使用先进的病原微生物安全检测技术对食品安全进行检验可从根本上实现对食品污染食品安全问题的有效改善。这可充分说明使用病原微生物安全检测技术的重要性与必要性,相关部门以及工作人员必须提高对该项技术的重视程度。
一、分子生物学技术
1.基因探针技术
在实际检测食品病原微生物的过程中我们可使用基因探针技术,注意在实际使用该项技术检测食品安全的过程中需要制作DNA探针,这需要我们对微生物特性基因的DNA双链中的一条链进行准确标记,必须在严格遵守基因配对原则的基础上杂交DNA分子,在此基础上观察待测样品与标记性DNA探针,主要考察内容为上述两部分内容是否会形成杂交分子,同时样品是否含有该种微生物也可在这一过程中得到明确。
在实际对放射性较强的样品进行微生物含量测定的过程中也可使用该种方法。特异性强、灵敏度较高、操作简单快捷以及检测时间跨度短等是基因探针技术的明显优势与特征,因此其现阶段已经逐步实现大范围的使用。
2.基因体外扩增技术
聚合酶链式反应就是指基因体外扩增技术,将样品体外形式作为主要依据实现对微生物具备的相应特定双链DNA片段的有效扩增就是基因体外扩增技术的实质与目标,最后针对该部分DNA片段扩增出来的产物样品进行一系列的检测工作,这是促使快速检测食品中微生物含量的检测工作得以顺利完成的重要手段。
二、免疫技术
1.乳胶凝聚反应
在实际检测检测食品病原微生物的过程中我们也可结合实际选择乳胶凝聚反应,抗原与抗体的特异性结合可在这一过程中得到最大限度的利用。大分子乳胶颗粒在吸附性能方面具备相当强的优势,在实际检测过程中可促使其实现对可溶性抗原的吸附,最终促使凝聚反应得以顺利实现。灵敏度、特异性能相对较高,并且具备快速、简便、准确等是乳胶凝聚反应最为明显的特征与优势。
2.酶联免疫法
在食品病原微生物快速检测技术中,酶联免疫法是一种固相免疫测定技术,在酶免疫测定技术领域中,应用范围最广。该方法是将已知抗原或者抗体在固原载体的表面进行吸附,保证其原本的免疫活性。
在实际的检测过程中,需要使待检测样本与酶标抗原或者抗体依据不同的操作步骤,分别与表面吸附了抗体或者抗原的固相载体发生反应,然后加入酶标抗体进行免疫复合物结合操作,分离开抗原或者抗体复合物与游离的未结合成分,分离时可以采用洗涤方法。
在检测程序的最后,加入酶反应底物,观察被酶催化后的底物产生的颜色、吸光度值大小,开展定量、定性总结分析。该种方式除了具有灵敏度高、特异性强的特点,还具有方便快捷、易于标准化的优点,该种检测方式多数被应用与多细菌检测工作中。
3.免疫磁性微球
免疫磁性微球是指具备表面结合单克隆抗体的一种磁性质微球,拥有超顺磁性、孔径较小等特点,多应用于细胞分离。该种微球的工作原理通常是通过免疫磁性球自动选择靶物质相应结合的过程,使其自身具备磁性相应的特征,让特异性抗体偶联于磁性质颗粒表面,从而与样品中的被检测病原微生物产生特异性的结合。
在此期间,当该种化合物通过反应中的磁场装置时,在外加磁场的作用力之下,承载着致病微生物的磁性颗粒会集中朝向于磁极方向运动,从而分离致病微生物,最终达到与其他复杂物质分离的目的。在食品安全检测过程中,被检测样品多数处于固液混合的物理状态,如果采用相对常规的方法,很难达到完全将其中的微量微生物分离开来的效果。
免疫磁性分离技术的研发,有效地解决了这一难题,并在当前阶段下的食品卫生检测与研究中得到了较广范围的运用。
三、代谢技术代
1.三磷酸腺苷生物发光法
三磷酸腺苷生物发光法主要应用于活菌记数数据统计。其工作原理为三磷酸腺苷在各种活的生物体中广泛存在,并且三磷酸腺苷在生物体中的含量是一直处于恒定状态的。
在活着的细菌体中,也存在三磷酸腺苷,如果细菌已经死亡,三磷酸腺苷在细胞内酶的作用下就会很快被分解。根据此工作原理,只需要准确测定被检测样品的三磷酸腺苷浓度,就可以计算出相应的活菌数量。
在检测过程中,需要先通过棉拭取样的方式展开萃取步骤,提取样品中的三磷酸腺苷,随之添加荧光素与荧光素酶混合物质,通过生物自身的发光量来分析总结出三磷酸腺苷的浓度与活菌数量。
2.放射测量技术
放射测量技术,主要是利用细菌能够将碳水化合物中的CO2,在自身生长繁殖的过程中代谢出来,然后进行碳水化合物分子中引入微量的放射性14C标记,也就是在细菌生长期间,利用诸多底物,以此达到释放出含有放射性CO2,然后使用自动化的放射测定仪器将14CO2的详细含量数据测量出来,为最后细菌数量的判断奠定基础。此技术已在食品细菌含量的测定工作中进行了有效的应用,具有明显的速度快、准确度高以及自动化等优势。
3.微热量计技术
通过测定细菌自身的生长期间表现出来的热量变化,从而检测与鉴别细菌的技术被称为微热量技术。不同细菌所体现出来的新陈代谢必然会不同,因此,各个细菌产生的热能量曲線相应的也会不同,将曲线表现出来的不同统一记录下来,就形成了指纹图型的特征。
在食品病原微生物检测过程中,会利用微量热计量仪测量出细菌在正常生长期间产生的热量,通过计算机进行数据计算分析过后,由产生的热量与时间两因素绘制成热曲线图,与已知的微生物热曲线开展比较,鉴别出细菌与细菌之间的区别。该种微热量计技术的运用,不仅有效地简化了食品安全检测技术鉴定步骤,也极大地缩短了检测的时间。
结语:
只有积极地应用分子生物学技术、免疫技术、代谢技术,在实际的食品安全保障系统中开发利用起来,才能建立起更具灵敏性、可靠性、有效性以及简便性的微生物检测体系。由此同时,其也是国际上食品微生物检测技术的研发方向与发展趋势。以上诸多中食品微生物检测技术的高效利用以及生物、化学等学科的交叉发展,必然会对当前食品安全检测管理水平提升起到促进作用。
参考文献:
[1]杨春光,王宏伟,彭心婷,等.食品病原微生物快速检测技术研究进展[J].食品安全质量检测学报,2015,29(1):41-47.
[2]陈爱亮.食源性病原微生物快速检测技术应用现状与发展趋势[J].食品安全质量检测学报,2014(1):173-186.
关键词:病原微生物;快速检测;分子生物学技术;生物传感器
在经济社会不断发展的大力推动之下人民群众的生活水平以及生活质量得到不同程度上的提升,人们对食品食用安全问题的重视程度也日渐提升。通过对现阶段食品安全现状进行分析后可以发现。使用先进的病原微生物安全检测技术对食品安全进行检验可从根本上实现对食品污染食品安全问题的有效改善。这可充分说明使用病原微生物安全检测技术的重要性与必要性,相关部门以及工作人员必须提高对该项技术的重视程度。
一、分子生物学技术
1.基因探针技术
在实际检测食品病原微生物的过程中我们可使用基因探针技术,注意在实际使用该项技术检测食品安全的过程中需要制作DNA探针,这需要我们对微生物特性基因的DNA双链中的一条链进行准确标记,必须在严格遵守基因配对原则的基础上杂交DNA分子,在此基础上观察待测样品与标记性DNA探针,主要考察内容为上述两部分内容是否会形成杂交分子,同时样品是否含有该种微生物也可在这一过程中得到明确。
在实际对放射性较强的样品进行微生物含量测定的过程中也可使用该种方法。特异性强、灵敏度较高、操作简单快捷以及检测时间跨度短等是基因探针技术的明显优势与特征,因此其现阶段已经逐步实现大范围的使用。
2.基因体外扩增技术
聚合酶链式反应就是指基因体外扩增技术,将样品体外形式作为主要依据实现对微生物具备的相应特定双链DNA片段的有效扩增就是基因体外扩增技术的实质与目标,最后针对该部分DNA片段扩增出来的产物样品进行一系列的检测工作,这是促使快速检测食品中微生物含量的检测工作得以顺利完成的重要手段。
二、免疫技术
1.乳胶凝聚反应
在实际检测检测食品病原微生物的过程中我们也可结合实际选择乳胶凝聚反应,抗原与抗体的特异性结合可在这一过程中得到最大限度的利用。大分子乳胶颗粒在吸附性能方面具备相当强的优势,在实际检测过程中可促使其实现对可溶性抗原的吸附,最终促使凝聚反应得以顺利实现。灵敏度、特异性能相对较高,并且具备快速、简便、准确等是乳胶凝聚反应最为明显的特征与优势。
2.酶联免疫法
在食品病原微生物快速检测技术中,酶联免疫法是一种固相免疫测定技术,在酶免疫测定技术领域中,应用范围最广。该方法是将已知抗原或者抗体在固原载体的表面进行吸附,保证其原本的免疫活性。
在实际的检测过程中,需要使待检测样本与酶标抗原或者抗体依据不同的操作步骤,分别与表面吸附了抗体或者抗原的固相载体发生反应,然后加入酶标抗体进行免疫复合物结合操作,分离开抗原或者抗体复合物与游离的未结合成分,分离时可以采用洗涤方法。
在检测程序的最后,加入酶反应底物,观察被酶催化后的底物产生的颜色、吸光度值大小,开展定量、定性总结分析。该种方式除了具有灵敏度高、特异性强的特点,还具有方便快捷、易于标准化的优点,该种检测方式多数被应用与多细菌检测工作中。
3.免疫磁性微球
免疫磁性微球是指具备表面结合单克隆抗体的一种磁性质微球,拥有超顺磁性、孔径较小等特点,多应用于细胞分离。该种微球的工作原理通常是通过免疫磁性球自动选择靶物质相应结合的过程,使其自身具备磁性相应的特征,让特异性抗体偶联于磁性质颗粒表面,从而与样品中的被检测病原微生物产生特异性的结合。
在此期间,当该种化合物通过反应中的磁场装置时,在外加磁场的作用力之下,承载着致病微生物的磁性颗粒会集中朝向于磁极方向运动,从而分离致病微生物,最终达到与其他复杂物质分离的目的。在食品安全检测过程中,被检测样品多数处于固液混合的物理状态,如果采用相对常规的方法,很难达到完全将其中的微量微生物分离开来的效果。
免疫磁性分离技术的研发,有效地解决了这一难题,并在当前阶段下的食品卫生检测与研究中得到了较广范围的运用。
三、代谢技术代
1.三磷酸腺苷生物发光法
三磷酸腺苷生物发光法主要应用于活菌记数数据统计。其工作原理为三磷酸腺苷在各种活的生物体中广泛存在,并且三磷酸腺苷在生物体中的含量是一直处于恒定状态的。
在活着的细菌体中,也存在三磷酸腺苷,如果细菌已经死亡,三磷酸腺苷在细胞内酶的作用下就会很快被分解。根据此工作原理,只需要准确测定被检测样品的三磷酸腺苷浓度,就可以计算出相应的活菌数量。
在检测过程中,需要先通过棉拭取样的方式展开萃取步骤,提取样品中的三磷酸腺苷,随之添加荧光素与荧光素酶混合物质,通过生物自身的发光量来分析总结出三磷酸腺苷的浓度与活菌数量。
2.放射测量技术
放射测量技术,主要是利用细菌能够将碳水化合物中的CO2,在自身生长繁殖的过程中代谢出来,然后进行碳水化合物分子中引入微量的放射性14C标记,也就是在细菌生长期间,利用诸多底物,以此达到释放出含有放射性CO2,然后使用自动化的放射测定仪器将14CO2的详细含量数据测量出来,为最后细菌数量的判断奠定基础。此技术已在食品细菌含量的测定工作中进行了有效的应用,具有明显的速度快、准确度高以及自动化等优势。
3.微热量计技术
通过测定细菌自身的生长期间表现出来的热量变化,从而检测与鉴别细菌的技术被称为微热量技术。不同细菌所体现出来的新陈代谢必然会不同,因此,各个细菌产生的热能量曲線相应的也会不同,将曲线表现出来的不同统一记录下来,就形成了指纹图型的特征。
在食品病原微生物检测过程中,会利用微量热计量仪测量出细菌在正常生长期间产生的热量,通过计算机进行数据计算分析过后,由产生的热量与时间两因素绘制成热曲线图,与已知的微生物热曲线开展比较,鉴别出细菌与细菌之间的区别。该种微热量计技术的运用,不仅有效地简化了食品安全检测技术鉴定步骤,也极大地缩短了检测的时间。
结语:
只有积极地应用分子生物学技术、免疫技术、代谢技术,在实际的食品安全保障系统中开发利用起来,才能建立起更具灵敏性、可靠性、有效性以及简便性的微生物检测体系。由此同时,其也是国际上食品微生物检测技术的研发方向与发展趋势。以上诸多中食品微生物检测技术的高效利用以及生物、化学等学科的交叉发展,必然会对当前食品安全检测管理水平提升起到促进作用。
参考文献:
[1]杨春光,王宏伟,彭心婷,等.食品病原微生物快速检测技术研究进展[J].食品安全质量检测学报,2015,29(1):41-47.
[2]陈爱亮.食源性病原微生物快速检测技术应用现状与发展趋势[J].食品安全质量检测学报,2014(1):173-186.