广东香葱炭疽病病原菌鉴定

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为明确广东香葱炭疽病的病原菌种类,在广东省香葱主要产区惠州市和韶关市采集香葱炭疽病疑似病株,分离、纯化病原菌;通过病原菌分生孢子悬液接种活体香葱植株和离体植株叶片,柯赫氏法则验证,明确病原菌的致病性;通过观察病原菌的形态特征,结合其核糖体内转录间隔区(ITS)、肌动蛋白(ACT)、几丁质合成酶1(CHS1)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)和β微管蛋白(TUB2)基因部分序列的多基因分子系统学分析等方法,确定病原菌的分类地位.从病样中分离获得23个形态特征相似的单分生孢子分离物.致病性人工接种结果表明,供试菌株分生孢子在20和25℃下均可侵染香葱产生与田间相似的炭疽病症状,老叶较嫩叶更易感病.20℃在PDA培养基上,供试菌株菌落呈灰色,菌丝生长速度较快;25和28℃菌丝生长较慢,菌落呈花瓣状;后期在菌落表面形成橘红色分生孢子堆.分生孢子梗透明,顶端簇生分生孢子;分生孢子透明,单细胞,微弯,大小13.1 ~ 19.6 μm×3.2 ~ 3.9 μm.附着胞深棕色,形状不规则,大小11.7~25.5 μm×5.0~ 14.3 μm;刚毛深棕色至浅棕色,基部膨大,顶端尖或圆滑,长为44.5 μm~106.4 μm.这些形态特征与白蜡树刺盘孢(Colletotrichum spaethianum)基本一致.供试菌株的ITS、ACT、CHS1、GAPDH和TUB2基因序列与白蜡树刺盘孢模式菌株CBS167.49对应基因序列的一致性为99.46%~100%.系统发育树显示,该菌株与白蜡树刺盘孢的3个菌株单独聚成一支.明确了广东香葱炭疽病的病原菌为白蜡树刺盘孢,这是白蜡树刺盘孢侵染香葱引起香葱炭疽病的首次报道.
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