【摘 要】
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为实现山羊痘病毒（GTPV）和口疮病毒（ORFV）的同步快速检测,基于GTPV的ITR基因及ORFV的059基因,分别设计用于普通双重PCR的引物2对、用于二联实时荧光定量PCR的特异性引物及探针2套
【机 构】
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云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室;
【基金项目】
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云南省重点新产品开发计划项目(2014BB014);云南省现代农业奶牛产业技术体系建设项目[云财农(2009)171号]
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为实现山羊痘病毒（GTPV）和口疮病毒（ORFV）的同步快速检测,基于GTPV的ITR基因及ORFV的059基因,分别设计用于普通双重PCR的引物2对、用于二联实时荧光定量PCR的特异性引物及探针2套;探针分别用5′JOE-Eclipse3′及5′FAM-TAMRA3′荧光染料标记物进行标记。结果显示,所建立的GTPV-ITR-L-ORFV-059双重普通PCR方法,可实现对GTPV与ORFV的特异性双重检测,检测敏感度可达104copies/μL DNA;所建立的ITR-059二联探针实时荧光定量PCR方法可同时特异性检测ORFV和GTPV产生特异性荧光信号,二联探针的检测敏感度可分别达102.87和102.52 copies/μL DNA。本研究初步建立了可同步特异性检测GTPV和ORFV的双重普通PCR及二联探针实时荧光定量PCR检测方法。
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