草鱼出血病病毒抗原亚单位的研制

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通过比较溶液的离子浓度对病毒形态结构的影响,发现GCHV在低盐溶液低温(-20℃)保存条件下,外壳蛋白会自动降解,但不十分完全。采用含1%NP40(Nonidetp40)的稀盐溶液处理感染病毒的细胞,经冻融及差异离心,电镜下观察到纯度较高的病毒双层衣壳、核心衣壳及散在的子粒。纯化的病毒亚单位用核酸酶消化后,与等量的福氏佐剂混合,免疫家兔制备抗体。该抗血清经中和试验测定,显示了较强的中和病毒的能力。纯化的病毒亚单位在7%聚丙烯酰胺凝胶电泳条件下,未见病毒电泳条带。同时采用地高辛标记的GCHVcDNA克隆探针,与病毒RNA及亚单位样品进行斑点杂交,检测病毒RNA灵敏度达到10pg.病毒亚单位样品均为阴性结果。该亚单位制剂具有纯度高、体积小的特点,将是一种安全性能好、使用方法简便、又便于保存和运输的亚单位疫苗。
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