小麦胚乳14-3-3蛋白的表达及其淀粉体淀粉合成酶的互作

来源 :作物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lczddd

【摘要】

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从小麦胚乳中克隆了14-3-3基因，并将其分别插入pET29c和pET41c质粒，用热激法转化大肠杆菌BL21-CodonPlus （DE3）-RP，得到高效表达的蛋白，但融合蛋白主要以包涵体的形式存在。可溶性

【作者】

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宋健民戴双李豪圣刘爱峰程敦公楚秀生 Ian J T

【机构】

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山东省农业科学院作物研究所,UniversityofGuelph

【出处】

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作物学报

【发表日期】

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2009年8期

【关键词】

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小麦14-3-3蛋白表达淀粉合成酶蛋白互作 Wheat14-3-3protein Expression Starch biosynthetic enzym

【基金项目】

：

本研究由国家自然科学基金项目（30700492）,国家高技术研究发展计划（863计划）项目（2006AA100102）,国际科技支撑计划项目（2006BAD01A02）,引进国际先进农业科学技术计划（948计划）项目[2006-G2（B）],公益性行业科研专项（NYHYZX07-002）,“泰山学者”建设工程,山东省农业良种工程项目资助.

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从小麦胚乳中克隆了14-3-3基因，并将其分别插入pET29c和pET41c质粒，用热激法转化大肠杆菌BL21-CodonPlus （DE3）-RP，得到高效表达的蛋白，但融合蛋白主要以包涵体的形式存在。可溶性的融合蛋白可直接通过S-蛋白琼脂糖树脂纯化。包涵体经8 mol L-1尿素溶解变性，稀释复性后，结合到S-蛋白琼脂糖树脂上，也得到纯化的融合蛋白。复性后的融合蛋白对蔗糖合成酶活性表现抑制作用，说明包涵体14-3-3融合蛋白恢复活性。将结合14-3-3融合蛋白的S-蛋白琼脂糖树脂作为诱饵与小麦胚乳淀粉

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