ADC患者体内HIV-1 gp120基因的变异及其对U87细胞合成PDGF-BB与MCP-1的影响

来源 :中华实验和临床病毒学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mythology_leonie
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目的

探讨HIV-1gp120在HIV-1入侵中枢神经系统(CNS)机制中的作用。

方法

扩增1例艾滋病痴呆综合征(ADC)患者外周主动脉周淋巴结(PL)和CNS颞叶灰白质连接处(TGWJ)、脑室周围组织(PV)的HIV-1 gp120基因,测序并进行序列分析;构建真核表达载体pEGFP-gp120,在U87细胞中表达gp120蛋白,观察绿色荧光蛋白荧光强弱判断gp120表达;同时用免疫组化方法检测蛋白的表达,ELISA法检测U87细胞中血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的含量。

结果

gp120基因序列分析结果显示,3个部位的HIV-1均为巨噬细胞嗜性,CNS来源的TGWJ和PV的HIV-1使用CCR5受体,与神经致病性有关。成功构建pEGFP- gp120表达载体,并在U87细胞中表达了gp120蛋白,转染后48 h蛋白表达量最高。ADC患者不同部位来源的gp120蛋白对U87细胞PDGF-BB水平无影响(P>0.05),但能增强其MCP-1的分泌水平,且来自外周PL的gp120对MCP-1的升高作用较CNS更显著(P<0.05)。

结论

ADC患者CNS gp120的变异提高了其对CNS环境的适应能力,与HIV的神经致病性有关;gp120蛋白可刺激U87细胞分泌MCP-1,而且外周来源的gp120作用较强,利于HIV-1入侵CNS。

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